DIABETES MELLITUS

domingo, 10 de julio de 2016

TERAPIA GENICA EN DIABETES MELLITUS


·       Tipo de terapia génica: Terapia génica in vivo

·         Gen o genes a tratar: Gen de la insulina

·         Enzimas: Introducción de enzimas Glucosinasa, intercambiada por la Hexoquinasa utilizada normalmente en el musculo, administración de pro insulina
·         Vectores usados: AAV Vectores Adeno Asociados de Citomegalo virus los cuales inducen la coexpresión  en el musculo esquelético de glucosinasa, transgen de insulina

·         Animales de estudio: Perros Beagle y ratones


·         ¿Cómo se obtuvo diabetes en estos animales? Se indujo la diabetes en los perros de 6 a 12 meses mediante una única administración intravenosa de estreptozotocina (35 mg / kg) y aloxano (40 mg / kg). Mientras que en los ratones edad 8 semanas se les administró, durante 5 días consecutivos, una inyección intraperitoneal de estreptozotocina (45 mg / kg de peso corporal) disueltos en / L de tampón citrat0,1 mol (pH 4,5) inmediatamente antes de la administración.

·         Procedimiento y Resultados: Se administro en dosis unica inyeccion intramuscular que contenia los vectores, lo cual hacia que las celulas musculares expresen pro insulina y glucosinasa, lo cual bajo en gran proporcion los niveles de glucosa en sangre. 


Qué tipo de genes son los responsables de causar la Esquizofrenia?

·         Polimorfismo en el cromosoma 22 que crea alteraciones en el metabolismo dopaminergico, motivo por el cual identificaron la patología como causa de un déficit en el funcionamiento de ciertos procesos neuronales.
·         Disbindina que se encuentra ubicada en el cromosoma 6p22.3, ésta se manifiesta en las terminales presinápticas con funciones específicas tanto en la formación y mantenimiento de la sinapsis, como en la transducción de señales.

·         Gen que codifica en la proteína NOTCH4 y se encuentra ubicado en el cromosoma 6p21.3.  NOTCH4 es una proteína que actúa como un receptor transmembranal cuya función es regular la diferenciación en todos los tipos de tejidos y organismos. 


BIBLIOGRAFÍA
Callejas D, Jam , Lage R, Griffol I. Treatment of Diabetes and Long-Term Survival After Insulin and Glucokinase Gene Therapy. Pubmed. 2013 May0; LXIII(dos).

domingo, 3 de julio de 2016

TERAPIA CON STEM CELL EN DM



Las Células Madre (SC) representan una fuente de reemplazo celular para cualquier tejido, el objetivo es diferenciar células madre embrionarias de ratón (mESC) a células pancreáticas tempranas, realizando su caracterización génica y morfológica. Primeramente se cultivaron y arrestaron en su ciclo celular fibroblastos embrionarios de ratón (MEF) con mitomicina, posteriormente se expandieron las mESC y se sometieron a un protocolo de diferenciación de 21 días hacía células pancreáticas tempranas, determinando además la producción de las proteínas insulina y glucagón mediante inmunocitoquímica y citometría de flujo. Los resultados sugieren la necesidad de continuar protocolos de diferenciación para determinar el comportamiento de ESC sometidas a diferenciación y su posible uso terapéutico al implantar células diferenciadas y especializadas en modelos animales. Los estudios se han dirigido a la generación de células productoras de insulina utilizando sistemas de cultivo a partir de ESC y EBs para proveer células trasplantables y útiles como herramienta terapéutica en enfermedades como la Diabetes Mellitus.

REFERENCIA

Vasquez Z, Sanchez M. Caracterización Morfológica, Génica y Protéica en la Diferenciación de Células Madre Embrionarias de Ratón a Células Pancreáticas Tempranas. SciELO. 2013 Diciembre; XXXI(4). http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0717-95022013000400044&script=sci_arttext

lunes, 20 de junio de 2016

TRANSGÉNICOS EN LA DM / VENTAJAS Y DESVENTAJAS

Los animales transgénicos más usados para simular Diabetes Mellitus son los RATONES, entre los cuales tenemos:
1. Modelos espontáneos


Modelos análogos
o  La rata Goto-Kakizaki (GK)
o  El ratón obeso de Nueva Zelanda (NZO)
o  El ratón KK
o  Psammomys obesus(rata israelí de la arena)
o  La rata OLETF (Otsuka Long-Evans Tokushima
·      fatty rat)

1.2. Modelos intrínsecos                         2. Modelos inducidos
·         El ratón db/db                                      ·         Inducción hormonal
·         El ratón ob/ob                                      ·         Administración de fármacos
·         El ratón Agouti                                     ·         Manipulación genética
·         La rata Zucker (fa/fa)

VENTAJAS:
1) Creación de nuevos medicamentos para tratar Diabetes Mellitus.
2) Realizar pruebas de tratamientos antes de lanzar los al mercado.
3) Realización de pruebas imposibles de realizar en humanos.
4) Profundizar en la enfermedad y contribuir al desarrollo de tratamientos efectivos.
5) Ensayar la seguridad de productos químicos.

DESVENTAJAS:
1) Pueden existir fallos al intentar la simulación de la enfermedad.
2) La realización de fármacos nuevos no siempre es efectiva, ya que no existe exacta similitud en el organismo del animal transgénico y el humano.
3) Dificultades técnicas en la manipulación.
4) Peligros de aplicación biomédica.
5) Pérdida de razas autóctonas



Días L, Balibrea J. Modelos animales de intolerancia a la glucosa y diabetes tipo 2. SciElo. 2007 Abril; XXII(2). http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0212-16112007000200005
Vite Roman A. Mi piel sana. [Online].; 2013 [cited 2016 Junio 20. Available from: http://www.mipielsana.com/alimentos-transgenicos/.

jueves, 16 de junio de 2016

ADN RECOMBINANTE (EJEMPLOS EN LA NATURALEZA Y EN LA DM)

El ADN recombinante se trata de un tipo de ADN formado por dos moléculas de ADN completamente distintas que pueden intercambiar segmentos y dar lugar a la aparición de nuevas combinaciones genéticas.
En la naturaleza
                             
El DNA se transfiere y se recombina naturalmente como por ejemplo en la reproducción celular de tipo meiotica donde se produce una transferencia y recombinación de material genético y se lo conoce como (Crossing Over).
En la DM

Los diabéticos usaban insulina porcina, pero no era bien tolerada. Hoy en día, han desarrollado bacterias que poseen el gen humano para la insulina que se ha insertado dentro de ellas utilizando técnicas de ADN recombinante. 

Existen dos rutas de producción de insulina humana utilizando microorganismo, bacterias, modificados. Una de ellas consiste en obtener por separado ambas cadenas para posteriormente asociarlas químicamente. La otra se basa en la producción de proinsulina que es procesada hasta insulina humana madura mediante métodos enzimáticos.

REFERENCIAS

Flores B. Instituto de Fisiología Celular de la UNAM. [Online].; 2008 [cited 2016 Junio 16. Available from: http://www.ejournal.unam.mx/cns/no34/CNS03408.pdf.
Mathew W. eHow en Español. [Online].; 2010 [cited 2016 Junio 16. Available from: http://www.ehowenespanol.com/usos-del-adn-recombinante-sobre_113734/.

sábado, 11 de junio de 2016

PRUEBAS MOLECULARES EN LA DM (MICROARRAY)

                                   
Microarrays de ADN han proporcionado a los investigadores médicos con una poderosa herramienta para estudiar los mecanismos de las enfermedades complejas, como DT2.  Su utilidad radica en que:

1. Se analiza el ARN mensajero aislado de una muestra biológica para determinar transcriptoma.
2. Se compara la expresión de todo el genoma en muestras de tejido enfermo frente a tejido sano. Aquellos genes que muestren un nivel de expresión diferente estarán potencialmente implicados en el desarrollo de la enfermedad.
3. Interacciones entre genes para agruparlos en rutas metabólicas o procesos celulares, lo que puede ayudar en la búsqueda de dianas terapéuticas.
4. Identificación de factores de transcripción o ligandos comunes a los diferentes genes cuya transcripción se presenta alterada en el microarray.
5. Dentro de la tecnología de microarrays, el desarrollo más reciente es el de los chips de células. Las aplicaciones más importantes de estos chips son la identificación de marcadores de enfermedades, el análisis toxicológico y la búsqueda de agentes patógenos




REFERENCIAS
Gonzalez JM, Lopez M, Ruiz G. Universidad Auntónoma de Madrid. [Online].; 2006 [cited 2016 Junio 11. Available from: http://www.madrimasd.org/informacionidi/biblioteca/publicacion/doc/vt/vt5_nanomedicina.pdf.
Catalá JRB. Unidad de Investigación en Endocrinología y Diabetes.. [Online].; 2011 [cited 2016 Junio 11. Available from: http://www.avpap.org/documentos/bilbao2006/genetica.htm.

sábado, 4 de junio de 2016

PRUEBAS DE TAMIZAJE Y CONFIMACION DE DIABETES MELLITUS

Entre las pruebas de tamizaje que podemos realizar para DM tenemos: 
-Prueba de glucosa basal: esta se realiza en ayunas y debe ser igual o mayor a 126 mg/dl.
-PTOG  (prueba de tolerancia oral de glucosa): La glucemia en el plasma sanguíneo debe ser igual o mayor a 200 mg/dl dos horas luego de ingerir glucosa.
-Prueba de insulina en la sangre. 

Por otra parte el examen confirmatorio a realizarse seria una prueba de Hemoglobina Glucosilada HbA1C: Sirve para observar los niveles de azúcar luego de 3 meses.
Los niveles normales son de menos del 6 %.Los diabéticos deben aspirar a un HbA1C  de menos del 7% en esta prueba.

                                                
Mendivil Anaya CMA. Universidad Nacional de Colombia. [Online].; 2007 [cited 2016 Junio 04. Available from: http://www.diabetes.unal.edu.co/Guias_DM2.pdf.
International Diabetes Federation. International Diabetes Federation. [Online].; 2010 [cited 2016 Junio 04. Available from: http://www.idf.org/webdata/docs/GGTD%20ES%2001%20Tamizaje%20y%20diagnostico.pdf.
ohnson & Johnson Medical Devices & Diagnostics Group. One Touch. [Online].; 2016 [cited 2016 Junio 04. Available from: http://www.onetouchla.com/pan/vida-diabetes/conoce-diabetes/sobre-diabetes/los-ultimos-estudios-sobre-el-diagn%C3%B3stico-de-la-diabetes.




sábado, 28 de mayo de 2016

ALTERACIONES DE LA EPIGENÓMICA EN LA DIABETES MELLITUS

En relación con la resistencia a la insulina se describió una asociación entre la metilación global del ADN y el índice HOMA28. Uno de los genes que puede jugar un papel destacado es PPARGC1A. Así, la metilación del promotor de PPARGC1A aumentó un 50% en los islotes pancreáticos de pacientes diabéticos en comparación con los no diabéticos. Su metilación en hígado se asocia con resistencia periférica a la insulina y con los niveles de insulina en ayunas.
Experimentos han revelado una  relación entre los eventos y  modificaciones en la cromatina. Un ejemplo es la asociación entre los cambios químicos de las colas amino-terminales de la histona H3 y la metiltransferasa Set7 especifica de lisinas. Su expresión parece ser crucial para mejorar la accesibilidad de la cromatina y la transcripción de los genes de las células β.


Milagro F, Martinez A. Epigenética en obesidad y diabetes tipo 2: papel. Revista chilena de endocrinología. 2013 Enero; VI(3).  http://soched.cl/Revista%20Soched/3-2013/4.pdf